Định lượng Tryglyceride trong huyết thanh
1. Khái quát về triglycerid
Triglycerid là một lipid thuần, là sản phẩm este hoá của glycerol và 3 acid béo.
Triglycerid được sinh ra từ hai nguồn nội sinh và ngoại sinh. Nội sinh là do gan tổng hợp nên, ngoại sinh là đưa từ bên ngoài vào qua thức ăn. Thức ăn giàu triglycerid là dầu thực vật, mỡ động vật (lượng triglycerid trong dầu thực vật hoặc mỡ động vật chiếm tới 90%).
Triglycerid có các vai trò chính như sau:
– Tam gia cấu tạo cơ thể.
– Cung cấp năng lượng cho cơ thể.
– Là dung môi hoà tan vitamin tan trong dầu.
– Bảo vệ cơ thể.
2. Nguyên tắc kỹ thuật
Lipase
Triglycerid + 3H2O ———————> Glycerol + 3 Axit béo
Glycerokinase
Glycerol + ATP ————————-> Glycerol 3phophate + ADP
Glycerol 3P oxydase
Glycero(3P) + O2——————————–> Dihydroxy aceton.P + H[sub]2[/sub]O[sub]2
Peroxydase
H2O2 + 4 Amino anti purin + phenol —————————————-> Quinonemin + H2O
(Phức hợp màu hồng cánh sen)
Đậm độ màu hồng tím tỷ lệ thuận với nồng độ triglycerid trong huyết thanh, được xác định ở bước sóng 546nm bằng phép đo diểm cuối.
3. Chuẩn bị
– Dụng cụ: bộ đồ lấy máu tĩnh mạch, ống nghiệm, giá ống nghiệm, pipet tự động, đầu côn, bút ghi kính, máy ly tâm, máy sinh hóa bán tự động.
– Thuốc thử: dựng bộ kit hóa chất mua sẵn gồm: reagent A- triglycerid và standard – triglycerid ( triglycerid mẫu có nồng độ 2,26 mmol/L).
4.Tiến hành
– Lấy máu tĩnh mạch, ly tâm lấy huyết thanh.
– Hút 500µL reagent A- triglycerid vào 3 ống: trắng (Tr), mẫu (M), thử (T)
– Hút 5mL dung dịch triglycerid mẫu vào ống mẫu
– Hút 5mL huyết thanh vào ống thử
– Lắc đều, để 10 phút ở nhiệt độ phòng hoặc 5 phút ở 37oC
– Đo máy ở bước súng 505nm, phương phỏp đo điểm cuối
– Tác phong: vụ khuẩn, sạch gọn, đúng kỹ thuật, đúng
Bình thường nồng độ tringlycerid máu là: 0,46 – 1,88 mmol/l.
Khi triglycerid máu > 2,3 m mol/l được gọi là tăng
Khi cholesterol máu tăng cao, đi kèm với sự tăng cao triglycerid máu chứng tỏ người bệnh có rối loạn lipid.
Tăng triglycerid máu có thể gặp trong các trường hợp sau: đái đường, bệnh về gan ( Hội chứng ứ mật, xơ gan ), viêm tuỵ cấp và mạn, hội chứng thận nhiễm mỡ,. Nồng độ triglycerid huyết thanh vượt quá 11,3 mmol/l có thể dẫn đến viêm tuỵ cấp và làm tăng thiểu năng mạch máu ngoại biên.
